ABSTRACT
SUMMARY: Gastrin plays a vital role in the development and progression of gastric cancer (GC). Its expression is up-regulated in GC tissues and several GC cell lines. Yet, the underlying mechanism remains to be investigated. Here, we aim to investigate the role and mechanism of gastrin in GC proliferation. Gastrin-overexpressing GC cell model was constructed using SGC7901 cells. Then the differentially expressed proteins were identified by iTRAQ analysis. Next, we use flow cytometry and immunofluorescence to study the effect of gastrin on the mitochondrial potential and mitochondria-derived ROS production. Finally, we studied the underlying mechanism of gastrin regulating mitochondrial function using Co-IP, mass spectrometry and immunofluorescence. Overexpression of gastrin promoted GC cell proliferation in vitro and in vivo. A total of 173 proteins were expressed differently between the controls and gastrin- overexpression cells and most of these proteins were involved in tumorigenesis and cell proliferation. Among them, Cox17, Cox5B and ATP5J that were all localized to the mitochondrial respiratory chain were down-regulated in gastrin-overexpression cells. Furthermore, gastrin overexpression led to mitochondrial potential decrease and mitochondria-derived ROS increase. Additionally, gastrin-induced ROS generation resulted in the inhibition of cell apoptosis via activating NF-kB, inhibiting Bax expression and promoting Bcl-2 expression. Finally, we found gastrin interacted with mitochondrial membrane protein Annexin A2 using Co-IP and mass spectrometry. Overexpr ession of gastrin inhibits GC cell apoptosis by inducing mitochondrial dysfunction through interacting with mitochondrial protein Annexin A2, then up-regulating ROS production to activate NF-kB and further leading to Bax/Bcl-2 ratio decrease.
La gastrina juega un papel vital en el desarrollo y progresión del cáncer gástrico (CG). Su expresión está regulada al alza en tejidos de CG y en varias líneas celulares de CG. Sin embargo, el mecanismo subyacente aun no se ha investigado. El objetivo de este estudio fue investigar el papel y el mecanismo de la gastrina en la proliferación de CG. El modelo de células CG que sobre expresan gastrina se construyó usando células SGC7901. Luego, las proteínas expresadas diferencialmente se identificaron mediante análisis iTRAQ. A continuación, utilizamos la citometría de flujo y la inmunofluorescencia para estudiar el efecto de la gastrina en el potencial mitocondrial y la producción de ROS derivada de las mitocondrias. Finalmente, estudiamos el mecanismo subyacente de la gastrina que regula la función mitocondrial utilizando Co-IP, espectrometría de masas e inmunofluorescencia. La sobreexpresión de gastrina promovió la proliferación de células CG in vitro e in vivo. Un total de 173 proteínas se expresaron de manera diferente entre los controles y las células con sobreexpresión de gastrina y la mayoría de estas proteínas estaban implicadas en la tumorigenesis y la proliferación celular. Entre estas, Cox17, Cox5B y ATP5J, todas localizadas en la cadena respiratoria mitocondrial, estaban reguladas a la baja en las células con sobreexpresión de gastrina. Además, la sobreexpresión de gastrina provocó una disminución del potencial mitocondrial y un aumento de las ROS derivadas de las mitocondrias. Por otra parte, la generación de ROS inducida por gastrina resultó en la inhibición de la apoptosis celular mediante la activación de NF-kB, inhibiendo la expresión de Bax y promoviendo la expresión de Bcl-2. Finalmente, encontramos que la gastrina interactuaba con la proteína de membrana mitocondrial Anexina A2 usando Co-IP y espectrometría de masas. La sobreexpresión de gastrina inhibe la apoptosis de las células CG al inducir la disfunción mitocondrial a través de la interacción con la proteína mitocondrial Anexina A2, luego regula el aumento de la producción de ROS para activar NF-kB y conduce aún más a la disminución de la relación Bax/Bcl-2.
Subject(s)
Animals , Mice , Stomach Neoplasms/metabolism , Stomach Neoplasms/pathology , Gastrins/metabolism , Annexin A2/metabolism , Mitochondria/pathology , Mass Spectrometry , NF-kappa B , Fluorescent Antibody Technique , Reactive Oxygen Species , Apoptosis , Cell Line, Tumor , Immunoprecipitation , Cell Proliferation , Carcinogenesis , Flow CytometryABSTRACT
ABSTRACT Background: Acid inhibition from chronic proton pump inhibitor use and a possible increase in gastrin can lead to changes in the regulation of hydrochloric acid production. However, it has not known whether such chronic use changes the presence of gastrin, delta, and enterochromaffin-like cells in the stomach or the relationship between gastrin and delta cells. Aim: To analyze the number of gastrin-producing gastrin cells, somatostatin-producing cells, and histamine-producing cells in patients who were chronic users of proton pump inhibitor, with or without related Helicobacter pylori infection. Methods: Biopsies from 105 patients, including 81 chronic proton pump inhibitor users (experimental group) and 24 controls, were processed immunohistochemically and subjected to counting of gastrin, delta, and enterochromaffin-like cells in high-magnification microscopic fields and in 10 glands. Results: Gastrin cell, delta cell, and enterochromaffin-like cells counts were similar across the groups and appeared to be unaffected by Helicobacter pylori infection. The ratio between gastrin cells and delta cells was higher in the chronic users of proton pump inhibitor group than in controls. Conclusion: Chronic users of proton pump inhibitor does not affect gastrin cell, delta cell, and enterochromaffin-like cell counts significantly, but may alter the ratio between gastrin cells and delta cells.
RESUMO Racional: A inibição ácida pelo uso crônico de inibidores de bomba de prótons e o possível aumento da gastrina podem ser seguidos de alterações na regulação da produção do ácido clorídrico. Ainda não está definido se o uso crônico altera a quantidade de células G, D e ECL no estômago ou a razão células G/D. Objetivo: Avaliar o número de células G - produtoras de gastrina -, células D - produtoras de somatostatina - e células ECL - produtoras de histamina -, em pacientes com uso crônico de inibidores de bomba de prótons, com ou sem infecção pelo Helicobacter pylori. Método: Trata-se de estudo retrospectivo avaliando 105 pacientes, 81 usadores crônicos de inibidores de bomba de prótons e 24 controles, através de biópsias com contagem das células G, D e ECL por estudo imunoistoquímico, de forma quantitativa onde havia maior número de células positivas por campo microscópico de grande aumento e em 10 glândulas. Resultados: Não houve diferença estatística comparando-se o número de células G, D e ECL. A razão entre as células G e D foi maior nos pacientes usadores crônicos de inibidores de bomba de prótons. Conclusão: O uso crônico de inibidores de prótons parece não interferir na contagem das células G, D e ECL, porém, interfere na razão entre as células G e D.
Subject(s)
Humans , Stomach Diseases/chemically induced , Gastrins/blood , Helicobacter pylori/isolation & purification , Helicobacter Infections/therapy , Proton Pumps/metabolism , Enterochromaffin-like Cells/metabolism , Proton Pump Inhibitors/therapeutic use , Stomach , Stomach Diseases/blood , Gastrins/physiology , Case-Control Studies , Helicobacter Infections/diagnosis , Enterochromaffin-like Cells/drug effects , Proton Pump Inhibitors/adverse effectsABSTRACT
The aim of this study was to determine the occurrence of EGUS and to quantify serum gastrin levels in jumping horses during competition season and interseason period. Forty jumping horses, competing at high level were randomly allocated into two groups, the Training Group: twenty jumping horses undergoing intense training and participating in competitions, and the Rest Group: twenty jumping horses in the interseason (resting period). The gastroscopic examinations and blood samples of the horses in the training group were performed 1-2 days following the competition while in the horses of the rest group, following 4 weeks of rest. The serum gastrin levels were measured at two different times: pre-feeding and two hours after feeding the horses (postprandial) by ELISA kit. Gastric lesion score data were compared by the Mann-Whitney U test (α= 0.05) and the mean gastrin values were compared between the groups and between the two moments by the paired tet tests, respectively (α= 0, 05). Squamous gastric ulcers were detected in 42.5% of all jumping horses examined independent of the period, competition season or interseason. Serum gastrin levels were significantly higher in the Training Group with no difference between pre-feeding and postprandial values.(AU)
O objetivo deste estudo foi determinar a ocorrência de EGUS e quantificar os níveis séricos de gastrina em cavalos de hipismo durante a época de competições e o período de férias. Quarenta cavalos de hipismo de alta performance foram aleatoriamente distribuídos em dois grupos, grupo treinamento: vinte cavalos de hipismo submetidos a treinamento intenso e participando de competições, e grupo descanso: vinte cavalos de hipismo em férias (período de descanso). As avaliações gastroscópicas e as coletas de sangue dos cavalos em treinamento foram realizadas um ou dois dias após as competições, enquanto nos cavalos do grupo descanso foram realizadas após quatro semanas de repouso. Os níveis séricos de gastrina foram mensurados por kit de ELISA, em dois momentos: antes da alimentação e duas horas após. Os dados de escore das lesões gástricas foram comparados pela prova U de Mann-Whitney (α= 0,05) e os valores médios de gastrina foram comparados entre os grupos e entre os dois momentos pelos testes t e t pareado, respectivamente (α= 0,05). Foram encontradas úlceras gástricas em 42,5% de todos os cavalos examinados, independentemente do período de competições ou repouso. Os níveis séricos de gastrina foram significativamente maiores no grupo treinamento, sem diferença entre os períodos pré e pós-alimentação.(AU)
Subject(s)
Animals , Male , Female , Stomach Ulcer/veterinary , Stomach Ulcer/epidemiology , Gastrins/blood , Horse Diseases/epidemiology , Endoscopy/veterinaryABSTRACT
ABSTRACT Objective: To evaluate the hormonal profile of patients with adolescent idiopathic scoliosis (AIS) and its relationship to the severity of the curvature and quality of life . Method: Patients with scoliosis (Cobb angle above 10°), of both genders, diagnosed after 10 years of age were included, excluding those who presented other condition that could lead to scoliosis. Serum levels of 25-hydroxyvitamin D (25-OHD), cortisol and gastrin were correlated with Cobb angle and quality of life, measured by the SRS-30 questionnaire . Results: The levels of 25-OHD decreased in 97% of patients. There was an inverse relationship between gastrin levels and quality of life (p = 0.016). Moreover, there was an inverse correlation between the value of Cobb angle and quality of life (p = 0.036). There were no changes in cortisol levels. There was no correlation between Cobb angle and any of the hormones measured . Conclusion: The patients had levels of 25-OHD diminished, strengthening the hypothesis of its involvement in the development of AIS. This study also suggests that increased gastrin levels may be associated with a worse quality of life in patients with AIS. Level of Evidence II, Diagnostic Study.
RESUMO Objetivo: Avaliar o perfil hormonal dos pacientes com escoliose idiopática do adolescente (EIA) e sua relação com a gravidade da curvatura e qualidade de vida. Método: Foram incluídos pacientes com escoliose (ângulo de Cobb acima de 10°), de ambos os sexos, diagnosticados após 10 anos de idade e foram excluídos aqueles que apresentassem outra condição que pudesse acarretar em escoliose. Os valores séricos da 25-hidroxivitamina D (25-OHD), cortisol e gastrina foram correlacionados com o ângulo de Cobb e a qualidade de vida, mensurada através do questionário SRS-30. Resultados: Os níveos de 25-OHD estavam reduzidos em 97% dos pacientes. Observou-se uma relação inversa entre níveis de gastrina e a qualidade de vida (p=0,016). Ademais, constatou-se correlação inversa entre o valor do ângulo de Cobb e a qualidade de vida (p=0,036). Não foram observadas alterações nos níveis de cortisol. Não houve correlação do ângulo de Cobb com o nível de nenhum dos hormônios dosados. Conclusão: Os pacientes apresentaram níveis de 25-OHD diminuídos, fortalecendo a hipótese da sua implicação no desenvolvimento da EIA. O presente estudo também sugere que o aumento dos níveis de gastrina possa estar relacionado com pior qualidade de vida nos pacientes com EIA. Nível de Evidência II, Estudo Diagnóstico.
ABSTRACT
Abstract Objective: To evaluate the safety, tolerability and potential therapeutic effects of gastrin-releasing peptide in three children with autistic spectrum disorder. Methods: Case series study with the intravenous administration of gastrin-releasing peptide in the dose of 160 pmol/kg for four consecutive days. To evaluate the results, parental impressions the Childhood Autism Rating Scale (CARS) and the Clinical Global Impression (CGI) Scale. Each child underwent a new peptide cycle after two weeks. The children were followed for four weeks after the end of the infusions. Results: The gastrin-releasing peptide was well tolerated and no child had adverse effects. Two children had improved social interaction, with a slight improvement in joint attention and the interaction initiatives. Two showed reduction of stereotypes and improvement in verbal language. One child lost his compulsion to bathe, an effect that lasted two weeks after each infusion cycle. Average reduction in CARS score was 2.8 points. CGI was "minimally better" in two children and "much better" in one. Conclusions: This study suggests that the gastrin-releasing peptide is safe and may be effective in improving key symptoms of autism spectrum disorder, but its results should be interpreted with caution. Controlled clinical trials-randomized, double-blinded, and with more children-are needed to better evaluate the possible therapeutic effects of gastrin-releasing peptide in autism.
Resumo Objetivo: Avaliar a segurança, a tolerabilidade e os possíveis efeitos terapêuticos do peptídeo liberador de gastrina em três crianças com transtorno do espectro autista. Métodos: Estudo de casuística com administração intravenosa de peptídeo liberador de gastrina na dose de 160 pmol/kg por quatro dias consecutivos. Para avaliar os resultados, foram usadas a impressão dos pais, a Escala de Classificação de Autismo na Infância (CARS) e a Escala de Impressão Clínica Global (CGI). Cada criança foi submetida a novo ciclo de peptídeo após duas semanas. As crianças foram acompanhadas por quatro semanas após o término das infusões. Resultados: O peptídeo liberador de gastrina foi bem tolerado e nenhuma criança apresentou efeitos adversos. Duas crianças apresentaram melhoria na interação social, com melhoria na atenção compartilhada e nas iniciativas de interação. Duas mostraram redução dos estereótipos e melhoria na linguagem verbal. Uma criança perdeu sua compulsão por banhos, efeito que durou duas semanas após cada ciclo de infusão. A redução média no escore da CARS foi de 2,8 pontos. Quanto à CGI, os resultados foram "minimamente melhor em duas crianças" e "muito melhor" em uma. Conclusões: Este estudo sugere que o peptídeo liberador de gastrina é seguro e pode ser efetivo na melhoria dos principais sintomas do transtorno do espectro autista, porém seus resultados devem ser interpretados com cautela. Ensaios clínicos controlados, randomizados, duplo-cegos e com maior número de crianças são necessários para melhor avaliar os possíveis efeitos terapêuticos do peptídeo liberador de gastrina sobre o autismo.
Subject(s)
Humans , Male , Child, Preschool , Gastrin-Releasing Peptide/administration & dosage , Autism Spectrum Disorder/drug therapy , Treatment Outcome , Administration, Intravenous , Autism Spectrum Disorder/diagnosisABSTRACT
PURPOSE: A comparison was done between the F. Paulino jejunal pouch (FP) and a jejunal pouch (JP) as esophagus-duodenum interpositional graft, for replacing the stomach after total gastrectomy. It was investigated the effect of the two procedures on esophagus histology, nutritional state and serum gastrin in rats. METHODS: Male Wistar rats weighing 282±17g were randomly submitted to sham operation (S), FP and JP after total gastrectomy. After eight weeks the rats were killed with overdose of anesthetic and tissue was taken from the distal esophagus for histology. Serum levels of total proteins, albumin, iron, transferring, folate, cobalamine, calcium, as well as serum gastrin were determined. Survival was considered. RESULTS: Fourty six rats were operated and thirty survived for eight weeks. Five (33.3%) died after FP and 11 (52.3%) after JP (p 0.05). Postoperative esophagitis occurred in 6 JP rats. At 8th week, no difference was observed on body weight when compared FP and JP rats (p>0.05). The JP rats had a significant decrease in serum albumin, glucose, transferrin, iron, folate and calcium, compared to sham (p 0.05). Serum gastrin, iron and calcium were significantly higher in JP rats than in FP rats (p 0.05). In FP rats, transferrin and cobalamine showed significant decrease comparing the preoperative with 8th week levels (p 0.05). CONCLUSION: F. Paulino pouch in rats had lower mortality than JP, and esophagitis was not detected in it. JP rats had serum gastrin, iron and calcium unaffected, possibly because of preservation of duodenal passage.
OBJETIVO: Estudo comparativo foi realizado entre a bolsa jejunal de Fernando Paulino (FP) e uma bolsa jejunal (JP) interposta entre o esôfago e duodeno, para substituir o estômago após gastrectomia . Foi investigado o efeito dos dois procedimentos na histologia do esôfago, estado nutricional e gastrinemia sérica em ratos. MÉTODOS: Quarenta e seis ratos Wistar pesando 282±17g foram aleatoriamente submetidos a sham operation (S), FP e JP após gastectomia total. Decorridas 8 semanas, foi colhido sangue por punção cardíaca para dosagem de proteínas totais, albumina, ferro, transferrina, folato, cobalamina, calcio, e gastrina. Os animais receberam dose letal de anestésico e tecido do esôfago terminal foi retirado para histologia. Foi observada a mortalidade operatória dos animais. RESULTADOS: Quarenta e seis ratos foram operados e 30 sobreviveram por 8 semanas. Cinco (33,3 %) morreram após FP e 11 (52,3%) após JP (p 0.05). Esophagitis pós-operatória ocorreu em 6 ratos JP. Na 8ª semana o peso corporal foi maior nosratos submetidos a FP do que JP (p>0.05). Os ratos submetidos a JP tiveram uma diminuição significativa na albumina, glucose, transferrina, ferro, folato e cálcio, comparado com o sham (p 0.05). Os níveis de gastrina sérica, ferro e calcio mostraram-se significantemente maiores nos ratos submetidos a JP do que nos FP (p 0.05). Nos ratos FP a transferrina e a cobalamina estiveram significantemente diminuídas comparando-se os níveis do pré-operatório com a 8ª semana (p 0.05). CONCLUSÃO: A bolsa jejunal de F. Paulino, em ratos, resultou em mortalidade operatória e incidência de esofagite de refluxo menor do que a interposição de JP. A JP não afetou a dosagem sérica de gastrina, ferro e cálcio, provavelmente devido à preservação da passagem dos alimentos pelo duodeno.